Nitrocellulosemembraner er en populær matrix, der bruges til proteinblotting på grund af deres høje proteinbindingsaffinitet, kompatibilitet med en række forskellige detektionsmetoder (kemiluminescens, kromogene og fluorescens), og evnen til at immobilisere proteiner, glykoproteiner eller nukleinsyrer.
Hvorfor bruger vi nitrocellulose?
Et nitrocelluloseglas, nitrocellulosemembran eller nitrocellulosepapir er en klæbende membran, der bruges til at immobilisere nukleinsyrer i southern blots og northern blots Den bruges også til immobilisering af proteiner i western blots og atomkraftmikroskopi for dets uspecifikke affinitet for aminosyrer.
Hvorfor bruges PVDF i Western blotting?
Western blotting ved hjælp af polyvinylidendifluorid (PVDF)-membraner er en af de mest populære teknikker til påvisning og karakterisering af proteiner. Hvis denne teknik kombineres med immundetektion, kan et bestemt proteins opførsel afklares.
Er nitrocellulosemembran hydrofob?
I modsætning til polyacrylamid giver nitrocellulose en passende støtte til efterfølgende proteinfarvning eller immunkemisk karakterisering. Binding til nitrocellulose er overvejende medieret af hydrofob interaktion (Schneider, 1980), selvom elektrostatiske kræfter også kan være involveret (Farrah et al., 1981.
Hvilken er bedre nitrocellulose eller PVDF?
Mens nitrocellulose er skørt og skrøbeligt, er PVDF mere holdbart og har højere kemisk resistens, hvilket gør den ideel til reprobing og sekventering. Nitrocellulose kan vise sig at være svær at strippe og gensonde uden at miste signal.
