Logo da.boatexistence.com

In vivo bimolekylær fluorescenskomplementering?

Indholdsfortegnelse:

In vivo bimolekylær fluorescenskomplementering?
In vivo bimolekylær fluorescenskomplementering?

Video: In vivo bimolekylær fluorescenskomplementering?

Video: In vivo bimolekylær fluorescenskomplementering?
Video: BiFC (Bimolecular fluorescence complementation) 2024, Kan
Anonim

Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) assay er en metode, der bruges til direkte at visualisere protein-protein-interaktion in vivo ved hjælp af levende-celle-billeddannelse eller fikserede celler. … BiFC blev først beskrevet af Hu et al.

Hvordan fungerer bimolekylær fluorescenskomplementering?

Arbejdsprincippet for BiFC er baseret på udviklingen af et fluorescerende kompleks, som et resultat af associationen af to segmenter af et fluorescerende protein, når de er tæt på hinanden på grund af protein-protein-interaktion i fragmenterne, dvs., i BiFC er en fluorofor opdelt i amino- og carboxylterminale ender.

Hvad er BiFC-test?

bimolecular fluorescence complementation (BiFC) assay muliggør enkel og direkte visualisering af proteininteraktioner i levende celler (45). BiFC-tilgangen er baseret på dannelsen af et fluorescerende kompleks, når to proteiner fusioneret til ikke-fluorescerende fragmenter af et fluorescerende protein interagerer med hinanden (fig.

Hvorfor udføres BiFC-testen?

Ideen med BiFC er at udtrykke halvdele af GFP fusioneret til dine proteiner af interesse Hvis POI'erne interagerer, kan du bringe begge halvdele sammen for at få en funktionel GFP. Så hvis der er den ene halvdel af et GFP udtrykt i cellen, er jeg ikke overrasket over, at et GFP-antistof kan detektere det.

Er BiFC reversibel?

Irreversibiliteten af BiFC-komplekser er blevet veldokumenteret (10), og det ser ud til, at de fleste, hvis ikke alle, fluorescerende protein- baserede BiFC-systemer er irreversible (8, 33, 43, 48–51).

Anbefalede: