Vortexing vil ikke skære dit RNA for at gøre det ubrugeligt, hvis du laver tilfældig priming RT - kun hvis du vil klone langt mRNA. Invitrogens tekniske support er også korrekt. Chloroform er tungere end Trizol og vil synke til bunden af røret.
Er det sikkert at vortex RNA?
Vortex ikke trizollysater eller RNA-prøver for at undgå klipning. Efter ekstraktion skal RNA-prøver altid holdes på is. Denne protokol er designet til prøver lyseret 1mL Trizol i et 1,5 eller 2mL rør.
Kan du opvarme RNA?
Undgå derfor høje temperaturer ( over +65°C), da disse påvirker RNA'ets integritet. For at smelte sekundære strukturer ud, opvarmes RNA til +65°C i 15 minutter i nærværelse af denaturerende buffere.
Hvordan resuspenderer du RNA-pellets?
gensuspender din pellet med varmt vand (40-50 grader celsius). inkuber ved 45 grader celsius i 10 minutter. sæt dem i +4 i 4-6 timer.
Hvordan udfælder du RNA?
A.
Efter at s altkoncentrationen er blevet justeret, kan RNA'et udfældes ved at tilsætte 2,5 volumener ethanol eller 1 volumen isopropanol og blande grundigt, efterfulgt af nedkøling i mindst 15 minutter ved -20°C.
