Logo da.boatexistence.com

Hvordan laver man immunfluorescens?

Indholdsfortegnelse:

Hvordan laver man immunfluorescens?
Hvordan laver man immunfluorescens?

Video: Hvordan laver man immunfluorescens?

Video: Hvordan laver man immunfluorescens?
Video: Immunocytochemistry (ICC) Visual Protocol 2024, April
Anonim

Det følgende er en oversigt over de forskellige trin i en protokol for indirekte immunfluorescensfarvning

  1. Eksperimentplanlægning og prøveforberedelse. …
  2. Prøvefiksering. …
  3. Cellepermeabilisering. …
  4. Blokering. …
  5. Primær antistofinkubation. …
  6. sekundær antistofinkubation. …
  7. Modfarve og montering.

Hvordan udfører du immunfluorescens?

Alle inkubationstrin finder sted ved stuetemperatur

  1. Vask cellerne to gange, og brug en pincet til forsigtigt at placere dækglasset med opadvendte celler i det befugtede kammer.
  2. Fiks med 4 % formaldehyd i 10 minutter og vask 3 ×.
  3. Permeabiliser med 0,1 % TX-100/PBS i 15–20 minutter og vask 3 ×.

Hvordan bruger man immunfluorescens i en celle?

Immunofluorescensprotokol for adhærente celler

  1. Frø 1–1,5 x104 celler pr. brønd på et 4-kammer objektglas i 500 mL dyrkningsmedium. Inkuber ved 37°C ved 5 % CO2.
  2. 32–36 timer efter cellepodning, fjern cellekulturmediet og skyl cellerne 3 gange med 500 µL 1X PBS.

Hvad er et eksempel på immunfluorescens?

For eksempel kan en forsker skabe primære antistoffer i en ged, der genkender adskillige antigener, og derefter anvende farvestofkoblede sekundære kaninantistoffer, der genkender gedeantistoffets konstante region (" kanin anti-ged" antistoffer).

Hvad er brugen af immunfluorescensfarvning?

Immunofluorescens (IF)-farvning er en meget brugt teknik i biologisk forskning og klinisk diagnostik IF anvender fluorescensmærkede antistoffer til at påvise specifikke målantigener. Efterfulgt af billeddannelse er det en meget direkte teknik, da du faktisk kan se noget.

Anbefalede: